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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3942 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鉤端螺旋體通用PCR檢測試劑盒說明書 | Leptospira spp.PCR | BKP3942 |
技術服務內容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：鉤端螺旋體通用PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292甘油三油酸醋，英文名或英文縮寫：Glycerol trioleate，級別：BR，97%，規(guī)格：5克
NK-92MI細胞，人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞 表達HBV病毒的人肝細胞,HepG2.2.15細胞 CL-0192RBL-2H3(大鼠嗜堿性細胞細胞)5×106cells/瓶×2流醋本安 cnilinq sulfctq 24-16-2
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21CASPASE-3INHIBITORVIICASPASE-3 抑制劑 VII試劑級米白色固體COLDsigma
KIRREL Others Mouse 小鼠 KIRREL1 / NEPH1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,9-二甲基鄰啰啉，英文名或英文縮寫：Neocuproine，級別：CP，99%，規(guī)格：50克
角臘上皮細胞生長添加物CEpiCGS(蛋白酶抑制劑)
IL12B Others Human 人 IL12B / P40 人細胞裂解液 (陽性對照) 正十五烷（標準品）N-PENTADECANE質量規(guī)格：內標
豬細胞;ST咖啡酸乙酯（標準品）ETHYL CAFFEATE質量規(guī)格：含量測定
VEGFC Others Rat 大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 人細胞裂解液 (陽性對照) 檸檬酸無水Citric acid質量規(guī)格：>99%,AR
人氣管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL檸檬酸無水（標準品）Citric acid質量規(guī)格：含量測定
OCM-1A細胞，人低侵襲性脈絡膜色素素瘤細胞 綠色木霉 小鼠樹突狀細胞細胞;DCS硫酸鉀（標準品）Potassium sulfate 質量規(guī)格：含量測定
鉤端螺旋體通用PCR檢測試劑盒說明書CLU Others Human 人 CLU / Clusterin 人細胞裂解液 (陽性對照) 氘代鹽酸(50g)Deuterium Chloride質量規(guī)格：D, 99.5% DCL 35% IN D2O
人成纖維細胞RNAHLF miRNA5 μg1酸-d3(100g )Phosphoric Acid-D3 (D, 99%)質量規(guī)格：D,99%
F13B Others Human 人 F13B / Coagulation factor XIII B chain 人細胞裂解液 (陽性對照) 氘代苯-D6(0.6ml x 10 )Benzene-D6質量規(guī)格：D,99.5%+0.05%TMS
U251 人神經(jīng)細胞氘代苯-D6(0.5ml x 10 )Benzene-D6質量規(guī)格：D,99.5%
CL-0426RKO-E6(人轉基因細胞)5×106cells/瓶×2氘代苯-D6(0.55ml x 10)Benzene-D6質量規(guī)格：D,99.5%+0.03%TMS
大鼠肝細胞瘤;H-4-II-EN-乙酰-D-色酸100克
SFPAC-1細胞，人細胞 人舌癌細胞系,Tca8113-P60細胞 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2α-溴代-γ-丁內酯 2-Bromo-4-butcnolidq 2061-1-
J82(人細胞) 5×106cells/瓶×2乙酰輔酶A25克
Promocell C-21070 Small Airway Epithelial CellGrowth Medium, 小上皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml鹽酸奈乙二安5克
人腦膜細胞裂解物HMCL.6-二甲基2,6-Lutidine
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
