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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4330 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
神經(jīng)肉孢子蟲PCR檢測試劑盒說明書 | Sarcocystis neuronaPCR | BKP4330 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:神經(jīng)肉孢子蟲PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal 7745-40-6 中文名: 分子式:C21H32O3 度:98.0% 小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
5-Aminouracil 932-52-5 中文名:5-氨基尿嘧啶 分子式:C4H5N3O2 度:98.0% 小鼠抗凝血酶受體(A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
5-Aminosalicylic acid 89-57-6 中文名:5-氨基水楊酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
5-Aminoindole 5192-03-0 中文名:5-氨基吲哚 分子式:C8H8N2 度:98.0% 小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
5-Aminoindazole 19335-11-6 中文名:5-氨基吲唑 分子式:C7H7N3 度:98.0% 小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)ELISAKit ELISA. 96T/48T
土壤中性0酸酶(S-NP)試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣 4-Amino-3-hydroxybenzoic acid 中文名:4-氨基-3-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0%
土壤中性0酸酶(S-NP)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 4-Aminobenzophenone 1137-41-3 中文名:4-氨基二苯甲酮 分子式:C13H11NO 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
土壤蔗糖酶(S-SC)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic acid 中文名:4-氨基-3-羥基-1-萘磺酸 分子式:C10H9NO4S
土壤硝態(tài)氮測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 Triamcinolone acetonide 76-25-5 中文名:曲安奈德 分子式:C24H31FO6 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
土壤纖維素酶(S-CL)試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣 4-Aminoantipyrine 1983/7/8 中文名:4-氨基安替比林 分子式:C11H13N3O 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
神經(jīng)肉孢子蟲PCR檢測試劑盒說明書P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2 MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠原成骨細胞)薯蕷皂甙質(zhì)量規(guī)格:BR,含量≥95.0%Dioscin
CL-0288MA-891(小鼠癌高轉(zhuǎn)移細胞)5×106cells/瓶×2薯蕷皂素(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.0%,標準品Diosgenin
CLEC4F Others Rat 大鼠 CLEC4F / CLECSF13 人細胞裂解液 (陽性對照) 薯蕷皂素質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRDiosgenin
人前脂肪細胞-內(nèi)臟cDNAHPA-v cDNAD-半胱氨酸鹽酸鹽一水質(zhì)量規(guī)格:度大于98%,BR,一水物D-Cysteine hydrochloride monohydrate
BCaP-37細胞,人癌細胞 猴腎細胞系,MA-104細胞 腸內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鈣蛋白酶抑制劑II(進口)質(zhì)量規(guī)格:≥95%,美國進口Calpain Inhibitor II(ALLM)
人微內(nèi)皮細胞HMMEC1,10-雙[(4-乙氧羰基)苯氧基]癸烷質(zhì)量規(guī)格:1,10-Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenoxy]decane
CD1D & B2M Others Human 人 CD1D & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4-苯二硫醇(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1,4-Benzenedithiol
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS31,3-雙[2-(4-羥苯基)-2-丙基]苯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1,3-Bis[2-(4-hydroxyphenyl)-2-propyl]benzene
大鼠癌細胞;SHZ-88 細胞,BEL-7405細胞 MEF細胞,早代小鼠胚胎成纖維細胞雙(氨甲基)降莰烷(含有)(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)Bis(aminomethyl)norbornane (mixture of isomers)
MG-63, 人細胞 Human1,4-雙(3-羥基苯氧基)苯(>96.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)1,4-Bis(3-hydroxyphenoxy)benzene
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。